基于2a基因型丙型肝炎病毒自身启动
发布时间：2012-08-14 03:13 来源：君健网
目的 构建丙型肝炎病毒(HCV)单顺反子复制子,研究其在Huh7.5和Huh7.1细胞中的复制功能,为研究HCV复制规律和抗病毒药物的筛选建立模型. 方法 用Quick change点突变方法删除pJ6JFH 1B1aRL质粒上的Core-E1-E2-p7-NS2片段(约3090 bp),得到△pJ6JFH1B1aRL,然后测序,选择序列正确的克隆,用AgeⅠ和AvrⅡ酶切回收目的片段约2280bp,同时用AgeⅠ和AvrⅡ酶切pSGRJFH1和其突变体质粒,回收载体片段.将目的片段和载体片段连接,构建由HCV-IRES启动的单顺反子复制子pSGRm-JFH IblaRL以及其变异突变体pSGRm-JFH 1b1aRLGND,用其RNA转染Huh7.5和Huh7.1细胞,研究复制子在细胞中的复制情况.结果 经过Quick change和多步克隆方法成功构建HCV-IRES启动的单顺反子复制子,复制子RNA转染Huh7.5和Huh7.1细胞72h后复制达高峰,96h复制开始下降,而对照的突变体从24h至96h均没有复制.结论 成功构建了HCV-IRES单顺反子复制子,转染Huh7.5和Huh7.1细胞后在不同时间均有复制.
肝硬化患者血清钠特点及含钠终末期... 上一篇 |下一篇 拉米夫定与阿德福韦酯初始联合
热门话题
- 6个表现辨别肝脏是否健康2015-02-06
- 乙肝患者吃不好病情加重2015-02-06
- 日常如何保护肝脏？2015-03-18
- 防治乙肝需均匀饮食2015-02-06
- 从发现到治愈：纵观丙型肝炎25年2014-12-29
- 乙肝有哪些典型的症状？2015-03-19
- “糖人”患肝癌危险性增三倍 2015-03-18
- 七类人群赶紧筛查丙肝2015-03-18
- 全国 爱肝日 ，一起小心肝！2015-03-18
- 肝脏给人类的一封信：我最怕5毒和3敌2015-10-26
-
医生姓名：刘伏友
所在科室：肾内科
工作医院：中南大学湘雅二医院
专业职称：主任医师
擅长疾病： 腹膜透析、各类肾病、慢性肾功能衰竭、尿毒症、血液...
