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小檗胺诱导体外培养的视网膜母细胞瘤
发布时间:2012-08-14      来源:
目的 观察探讨小檗胺(BBM) 对体外培养的视网膜母细胞瘤(RB)HXORB44细胞增生和凋亡的影响及其机制。方法 体外培养RB细胞,取对数生长期细胞分为BBM处理组和空白对照组。BBM处理组分别加入2、4、8、16、32 mg/L BBM,作用24、48、72 h后, 四氮唑(MTT)比色法检测细胞增生活性;4、8、16 mg/L BBM作用24 h后,流式细胞仪检测细胞早期细胞凋亡率,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞内B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、Bax蛋白的表达,比色法检测半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的活性。结果 BBM以时间剂量依赖方式显著抑制RB细胞的增生(24 h:F=70.547,48 h: F=603.438,72 h: F=577.521;P<0.01)。作用24、48、72 h,半数抑制浓度分别为25.26、10.94、6.25 mg/L。空白对照组和不同浓度BBM处理组细胞坏死率分别为(1.25±0.45)%、(4.10±2.95)%、(4.39±0.21)%、(10.54±4.38)%,与空白对照组比较,差异有统计学意义(F=6.527,P<0.05);晚期凋亡和坏死率分别为(2.13±0.71)%、(5.45±2.31)%、(9.86±3.18)%、(11.10±1.70)%,与空白对照组比较,差异有统计学意义(F=10.845,P<0.05);早期凋亡率分别为(0.51±0.26)%、(2.68±0.35)%、(5.97±0.50)%、(11.22±1.17)%,与空白对照组比较,差异有统计学意义(F=144.976,P<0.01)。BBM剂量依赖性地减少bcl-2 的表达,增加Bax的表达,降低bcl-2/Bax比值,增强Caspase-3活性,差异均有统计学意义(bcl-2:F=835.726,Bax:F=111.963,Caspase-3:F=298.058;P<0.01)。结论 BBM体外能抑制RB细胞增生并诱导细胞凋亡或坏死。其机制可能与下调bcl-2 的表达,上调Bax的表达,并增强 Cspase-3的活性有关。
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